人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)Elisa試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到
100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
巨噬細胞趨化蛋白-1(MCP-1)
腫瘤壞死因子-a(TNF-a)
可溶性細胞間黏附因子-1(sICAM-1)
可溶性血管間粘附因子-1(VCAM-1)
白介素-6(IL-6)
白介素-8(IL-8)
高敏C-反應蛋白(hs-CRP)
內(nèi)皮素(ET)
一氧化氮(NO)
血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)
血管緊張素I (腎素、AngI)
醛固酮(ALD)
基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)
氧化低密度脂蛋白(ox_LDL)
可溶性細胞表面分化抗原40配體(sCD40L)
脂聯(lián)素(adiponectin)
組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)
纖溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)
E-選擇素(E-Selectin)
P-選擇素 CDp62 血小板活化
同型半胱氨酸
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)